southern印迹杂交(southernblot名词解释)

没有你的天空没有云朵 8 2024-10-22

southern blot名词解释

Southern Blot(Southern印迹杂交)是一种分子生物学技术,用于检测DNA中的特定序列。它是由英国生物学家Edwin Southern在1975年发明的,因此被命名为“Southern”。Northern印迹杂交(Northern blot)。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。

核酸标记物几类1.核素标记物放射性核素目前应用类探针标记物.放射性核素灵敏度极高,检测10-14~10-18克物质。[1]将胶片切成合适大小,切去右上角作为记号。[2]将胶片放进盛有变性缓冲液(1.5mol/L NaCl,0.5mol/L NaOH)的盘中轻晃15min。

因为该技术由Southern于1975年创建,所以称为Southern印迹杂交技术。Southern印迹杂交是先将DNA样品(含不同大小的DNA片段)先按片段长短进行分离,然后进行杂交。这样可确定杂交靶分子的大小。因此,制备DNA样品后需要进行电泳分离。

①Southern印迹杂交:用于分析DNA,包括两个主要过程:一是印迹,即将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物(硝酸纤维素膜或尼龙膜)上;二是退火,与固定于膜上的同位素标记的探针进行分子杂交。研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA。 Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。(1)将膜浸入5×SSC 中2min,将膜放入干净的塑料袋中。(2)将预杂交液事先在65℃ 预热,然后将10 ml 预杂交液加入袋中,封口。(3)65℃预杂交1h 以上,不时摇动。

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